Efectos de la inhibición de C-FLIPL en líneas celulares de cáncer de cuello uterino.

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Carmen G. Ili; Priscilla Brebi; Patricia Garcia; Pamela Leal; Jaime Lopez; Oscar Tapia; Pablo Letelier; Helga Weber; Jonathan Castillo & Juan C. Roa

Resumen

Cuando las variantes Short y Raji de la proteína Cellular FLICE-like inhibitory protein (c-FLIP) se encuentran sobrexpresadas son capaces de inhibir la apoptosis, mientras la función de la isoforma Long (c-FLIPL), depende de la concentración de esta molécula en las células. El objetivo de este estudio fue determinar los efectos de la inhibición de c-FLIPL en líneas celulares de cáncer de cuello uterino. Para realizar el estudio fueron utilizadas SiHa, C-4I y C-33A, líneas celulares de cáncer cervical. La expresión de c-FLIPL en estas líneas fue establecida mediante PCR en tiempo real y western blot. Posteriormente la expresión de c-FLIPL fue inhibida, mediante transfeción transiente con siRNA complementario al mRNA mensajero de c.-FLIPL. Los efectos de esta inhibición en la viabilidad celular, proliferación y apoptosis fue comparada con células transfectadas con un siRNA control (scrambled). Una vez reprimido c-FLIPL, las líneas celulares SiHa y C-4I presentaron un aumento de la viabilidad celular (P<0,05). Para evaluar la proliferación celular se utilizó inmunocitoquímica de los marcadores Ki-67 y PCNA. Las células SiHa transfectadas con siRNA c-FLIPL, mostraron una elevada expresión de Ki-67 (P<0,0001), mientras que las células C-33A con c-FLIPL inhibido mostraron una menor expresión de PCNA (P<0,01). Las tres líneas celulares con c-FLIPL reprimido mostraron un mayor nivel de apoptosis que las células control. Estos resultados sugieren que c-FLIPL puede tener efectos en la proliferación y apoptosis de líneas celulares de cáncer de cuello uterino.

PALABRAS CLAVE: Apoptosis; Proliferación; Cáncer cervicouterino; siRNA; c-FLIPL.

Como citar este artículo

ILI, C. G.; BREBI, P.; GARCIA, P.; LEAL, P.; LOPEZ, J.; TAPIA, O.; LETELIER, P.; WEBER, H.; CASTILLO, J. & ROA, J. C. Effects of c-FLIPL knockdown in cervical uterine carcinoma cell lines. Int. J. Morphol., 33(2):638-646, 2015.