Mariana Rojas; Gustavo Saint-Pierre; Ricardo Hartley; Bélgica Vásquez; Daniel Conei & Mariano del Sol
Con el fin de llevar a cabo un diagnóstico de las diferentes patologías que afectan a la etapa de alevín de salmón (Salmo salar) y analizar las fases de regeneración de los centros de organización y el tejido subyacente en caso de una amputación, se realizó un estudio que permitió identificar la ubicación temporal y espacial del morfógeno Sonic hedgehog (Shh) en la etapa de alevines eclosionados. Se utilizaron quince alevines de salmón (Salmo salar). Fueron anestesiados con benzocaína al 5% (BZ- 20®, Veterquímica), se fijaron en formalina tamponada al 10%, e incluidos en paraplast. Se utilizó Shh anticuerpo policlonal (Santa Cruz H-160, conejo) dilución 1/100. Se enjuagaron posteriormen- te en PBS-1% Triton y se incubaron con anticuerpo conjugado con polímero anti-conejo y HRP durante 10-15 minutos. Se utilizó como sustrato DAB (Vector) durante 1-5 minutos. El control negativo se incubó sin anticuerpo primario. Como un control positivo interno se consideró la notocorda. Se analizaron secciones sagitales en serie consignando los tejidos y órganos marcados positivamente y se describieron morfológicamente. Se logró el objetivo de reconocer la localización espacial y temporal de Shh. La notocorda, las neuronas de la médula espinal y los ganglios, la capa basal de la piel y también los escleroblastos de las lepidotriquias fueron iden- tificados positivamente para Shh. También se observó positivo el intestino y los túbulos renales. La heterogeneidad observada en la ubicación del morfógeno Shh sugiere su uso potencial como un marcador de los centros de regulación en Salmo salar, y una venta- ja potencial en el diagnóstico de las malformaciones de la etapa de alevines de salmón, además de una mejor comprensión de la rege- neración de tejidos.
PALABRAS CLAVE: Sonic hedgehog; alevín de sal- món; immunohistoquímica; anticuerpo antiShh.
ROJAS, M.; SAINT-PIERRE, G.; HARTLEY, R.; VÁSQUEZ, B.; CONEI, D. & DEL SOL, M. Immunolocalization of morphogen sonic hedgehog in salmon fry (Salmo salar). Int. J. Morphol., 34(2):770-774, 2016.
