Pía Loren; Carolina Cheuquemán; Jennie Risopatrón; Ricardo Felmer; María E. Arias & Raúl Sánchez
El estrés oxidativo es definido como un desbalance entre la producción de oxidantes y antioxidantes. La inducción de tolerancia a estrés en los ovocitos conllevaría a un mejor desarrollo embrionario. En bovinos, la incubación de ovocitos maduros con diferentes estresores (térmicos, alta presión hidrostática, oxidativos) incrementaría la tasa de generación de blastocitos. Este estudio evalúa el efecto de la modulación del estado redox incrementando el estrés oxidativo con H2O2 en ovocitos maduros bajo condiciones de cultivo in vitro y su efecto sobre el potencial de desarrollo embrionario. Para ello, ovocitos procedentes de ovarios de matadero fueron madurados en medio TCM-199 suplementado durante 22–23 h, a 38,5 °C, 5 % CO2 y humedad a saturación. Al final de las 22–23 h se incubaron los ovocitos maduros con 0, 50, 100 y 200 μM H2O2. La fecundación in vitro se realizó co-incubando los ovocitos durante 18 h con una concentración final de 1x106 espermatozoides/mL. Los presuntos cigotos fueron denudados y cultivados en medio KSOM-0,4 % BSA a 38,5 °C en atmósfera de baja tensión de O2 (5 % O2, 5 % CO2 y 90 % N2) y humedad a saturación. El estrés oxidativo inducido con H2O2 a una concentración de 50 y 100 μM produce una tasa de división de los embriones similar al control (88,7 %, 83,2 % y 86,4 % respectivamente, p>0,05), disminuyendo significativamente al utilizar una concentración de 200 μM (58,8 %, p<0,05). Asimismo, H2O2 causó un efecto similar en la tasa de blastocitos con 50 μM (20,4 % vs. 25,8 % control, p>0.05) pero disminuyó significativamente con 100 y 200 μM (10,7 % y 3,3 % respectivamente, p<0,05). Es posible, que estos embriones resistentes al estrés oxidativo puedan tener una mayor sobrevida durante los procesos de criopreservación que generan altos niveles de especies reactivas de oxígeno en los embriones.
PALABRAS CLAVE: Fecundación in vitro; Estrés oxidativo; Tolerancia a estrés; Especies reactivas de oxígeno.
LOREN, P.; CHEUQUEMÁN, C.; RISOPATRÓN, J.; FELMER, R.; ARIAS, M. E. & SÁNCHEZ, R. Modulation of redox state by hydrogen peroxide in the stage of oocyte maturation: Effect on embryonic development in cattle. Int. J. Morphol., 34(2):431-435, 2016.