Diferentes Métodos de Preparación de Muestras para la Evaluación Morfológica Glomerular ¿Recubrir o no Recubrir?

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Priscila Fernandes dos Santos; Diogo Benchimol de Souza; Eduardo José Lopes Torres; Waldemar Silva Costa; Francisco José Barcelos Sampaio & Bianca Martins Gregorio

Resumen

El glomérulo renal está recubierto por células endoteliales fenestradas y cubierto externamente por células epiteliales especializadas, conocidas como podocitos. La microscopía electrónica de barrido se convierte en una herramienta importante y efectiva para sus estudios. Normalmente, las muestras destinadas a microscopía de barrido se cubren con una capa metálica delgada. Sin embargo, este paso se puede dispensar para algunos análisis. El objetivo fue comparar muestras recubiertas y no recubiertas para evaluar la morfología glomerular del riñón de rata Wistar. Se utilizó la región cortical del riñón de ratas Wistar macho de 5 meses de edad. Se realizó el procedimiento de rutina para el procesamiento de microscopía electrónica de barrido. La mitad de 10 fragmentos se recubrieron con oro paladio y los restantes no se recubrieron. Se utilizó un microscopio electrónico de barrido SEM Auriga Compact FIB para observar las muestras. Se evaluaron diferentes aumentos y voltajes. Para las muestras no recubiertas, al usar voltajes de 2 KV (o más) se observó una gran carga, impidiendo el uso de dicho voltaje. Por lo tanto, estas muestras siempre se observaron a bajo voltaje de 0,5 KV. Por otro lado, en las muestras recubiertas, el uso de 2 KV fue adecuado. Como consecuencia, en las muestras recubiertas, las estructuras de los podocitos se caracterizaron mejor, generando mejores imágenes. Inversamente, en las muestras no recubiertas, fue posible visualizar las estructuras deseadas y detectar las características morfológicas de éstas. Los resultados mostraron que es posible utilizar muestras de riñón sin recubrimiento previo para evaluar la morfología glomerular a nivel ultraestructural, que sirve como una herramienta en el estudio de patologías.

PALABRAS CLAVE: Morfología glomerular; Barrera de filtración renal; Microscopía electrónica de barrido.

Como citar este artículo

DOS SANTOS, P. F.; DE SOUZA, D. B.; TORRES, E. J. L.; COSTA, W. S.; SAMPAIO, F. J. B. & GREGORIO, B. M. Different sample preparation methods for glomerular morphological evaluation: To coat or not to coat? Int. J. Morphol., 37(2):477-480, 2019.