Haiyan Qin; Ruizhu Liu; Wenting Nie; Mingxi Li; Liehao Yang; Changcai Zhou; Lianbo Zhang1& Guang Zhang

La identificación de un cultivo de fibroblastos queloides primarios, siempre ha sido una medida fun- damental para estudiar los mecanismos de la enfermedad queloide. La calidad del cultivo de células primarias puede afectar directa- mente los resultados de otros experimentos. Este estudio se realizó para investigar las condiciones óptimas de crecimiento, in- cluido el tiempo óptimo de almacenamiento y el tiempo de tratamiento con colagenasa, para modelos de cultivo celular in vitro y los métodos adecuados para la separación epidermis-dermis en diferentes tejidos. Se recogieron de los pacientes tejidos queloides, tejidos circundantes queloides y tejidos cutáneos normales, para cultivo primario de fibroblastos. Se implementaron y compara- ron dos métodos, explante de tejido y digestión con colagenasa. Los niveles de expresión de los genes relacionados con queloides α-SMA, Col1 y Col3 se evaluaron en células cultivadas usando ambos métodos, para verificar las cualidades de las células primarias. Se realizó un análisis comparativo entre los dos métodos y entre los tres tejidos diferentes utilizados. La contaminación de bacterias y lípidos se minimizó inmediatamente después de que se procesaron las muestras. Se requirieron varios métodos de eliminación de la epidermis y diferentes tiempos de digestión con colagenasa en los tejidos para generar resultados óptimos. Los resultados de la PCR en tiempo real mostraron que los niveles de expresión de ARNm de genes relacionados con queloides en fibroblastos cultivados se correlacionaban con su perfil de expresión in vivo, como se informó en estudios anteriores. Los resulta dos de este studio indicaron varios puntos clave en el cultivo de fibroblastos queloides primarios y han demostrado la correlación en la expresión génica entre fibroblastos queloides in vivo y fibroblastos queloides primarios in vitro.

PALABRAS CLAVE: Queloide; piel normal; fibroblastos; cultivo de células primarias;  α-SMA

QIN, H.; LIU, R.; NIE, W.; LI, M.; YANG, L.; ZHOU, C.; ZHANG, L. & ZHANG, G. Comparison of primary keloid fibroblast cultivation methods and the characteristics of fibroblasts cultured from keloids, keloid-surrounding tissues, and normal skin tissues. Int. J.Morphol.,39(1):302-310, 2021.