Observación Morfológica de Células Madre Mesenquimales de Médula Ósea en Condiciones de Cultivo Tridimensional con Matrigel

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Lu-Lu Liu; Bin-Bin Zhang; Quan-Wen Gao; Li Bing; Huang Sha & Yao Bin

Resumen

Matrigel es una matriz de membrana basal ex- traída del tumor de ratón EHS que contiene proteína de matriz extracelular. Los componentes principales son laminina, el colágeno tipo IV, nestina, sulfato de heparina, factor de crecimiento y metaloproteinasa de matriz. A temperatura ambiente, Matrigel se polimerizó para formar una matriz tridimensional. Es posible simular la estructura, la composición, las propiedades físicas y las funciones de la membrana basal celular in vivo, lo que es beneficioso para el cultivo y la diferenciación de las células in vitro, y se puede utilizar para el estudio de la morfología celular, la función bioquímica, la mi- gración, infección y expresión génica. En este estudio, se estableció el modelo de cultivo tridimensional Matrigel de células madre mesenquimales de médula ósea (BMSC), y se observó su morfología, proliferación y supervivencia. Las BMSC fueron aisladas y cultivadas con el método de adherencia de la médula ósea completa. Se seleccionaron las BMSC de segunda generación con buenas condiciones de crecimiento y se mezclaron con Matrigel para formar complejos de gel de células. La morfología y la proliferación de las células madre mesenquimales se observaron con microscopio de contraste de fase y se tiñó con Hematoxilina-Eosina (HE); para evaluar la actividad celular se usó la tinción Live/Dead. La microscopía de contraste mostró que las BMSC se reticularon en Matrigel y proliferaron bien. Después de 7 días, se observó que el gel de matriz gradualmente se volvió blando y colapsó, y se visualizó un cruce transversal de algunas células reticulares a los 14 días. La tinción mostró que la mayoría de las células mostraron una fluorescencia verde con la prolongación del tiempo de cultivo; en los primeros 4 y 7 días, la actividad de las células madre mesenquimales de la médula ósea en Matrigel aumentó gradualmente y los porcentajes fueron de 92,57 %, 95,54 % y 97,37 %, respectivamente. El sistema de cultivo tridimensional de Matrigel puede mantener la morfología, la función y la capacidad de proliferación de las células madre mesenquimales de la médula ósea.

PALABRAS CLAVE: Morfología; Ingeniería de tejidos; Células madre.

Como citar este artículo

LIU, L. L.; ZHANG, B. B.; GAO, Q. W.; BING, L.; SHA, H. & BIN, Y. Morphological observation of bone marrow mesenchymal stem cells under matrigel three dimensional culture conditions. Int. J. Morphol., 37(1):54-58, 2019.